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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR如何扩未知基因组的基因？
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棒棒糖甜

新虫 (小有名气)

[求助] PCR如何扩未知基因组的基因？ 已有1人参与

PCR扩了两个月的基因依旧没有批出来条带，首先以相似物种设计引物，其次以同源比对序列设计引物，很是惆怅，短短三年挥指已过半年，请问大家都是怎么扩物种的未知基因的？网上没有报道该物种的基因组序列信息。

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1楼 2018-01-31 22:08:35
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snhajn

新虫 (著名写手)
我也挥霍了半年

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2楼2018-01-31 22:56:35
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snhajn

新虫 (著名写手)
过完年继续挥霍

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3楼2018-01-31 22:56:51
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
★
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-02-02 04:47:29
就是做RACE呗，步骤和你讲述的一样，首先以相似物种设计引物，其次以同源比对序列设计引物。多设计几对引物，还有注意提取的RNA组织部位，有些基因只在特定组织上表达或者表达量比较低，这些都需要注意，多参考其他物种的同源基因表达情况。
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。
4楼2018-02-01 03:05:49
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一叶知秋365

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用sitefinder方法，或者基因组步移的方法，

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

棒棒糖甜
5楼2018-02-01 11:06:54
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
首先在保守区设计几组引物，换着用，可以巢式的P，扩增中间片段；然后做RACE。

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6楼2018-02-01 17:03:31
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棒棒糖甜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by snhajn at 2018-01-31 22:56:51
过完年继续挥霍



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7楼2018-02-01 20:26:14
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棒棒糖甜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 一叶知秋365 at 2018-02-01 11:06:54
用sitefinder方法，或者基因组步移的方法，

谢谢！我第一次听说site  Finder和基因组步移这个概念，我好好查查，希望对我有用

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8楼2018-02-01 20:42:06
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棒棒糖甜

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 一叶知秋365 at 2018-02-01 11:06:54
用sitefinder方法，或者基因组步移的方法，

谢谢！

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9楼2018-02-01 20:43:06
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