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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 谁跑过native-page，求助
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树犹如此-

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谁跑过native-page，求助
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需要跑native-page，希望跑过的能指导指导我，或者推荐相关文献也可以，分享你的经验那更好了。我从来没跑过，几乎不懂，求帮助，我的样品是多肽。谢谢各位了。

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1楼 2018-01-31 17:43:13
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xueguangpu

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
除去SDS-PAGE过程中所有的SDS就可以了，样品所能接触到的统统用洗洁精清洗干净，并用二次水（去离子水）冲洗，晾干后使用。一定要冲洗彻底，洗洁精中也含有SDS, 残留的sds会影响样品的结合。所用的loading buffer和电泳缓冲液都要是不含SDS的。跑电泳时不用使用蛋白Marker, 但是每个样品的单体都要拿来做对照，然后以不同比例的单体蛋白混合后制备复合物，跑电泳。跑电泳时尽可能在低压低温下进行，电压在120V或者更低，电泳缓冲液需要预冷以后使用，放在冰水混合物中进行电泳。对比单体蛋白的条带和复合物条带的差异就能看出来两个蛋白样品是否结合了。如果蛋白结合力比较弱可以试着降低盐浓度

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32楼2018-01-31 19:16:04
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xjh1990892楼
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andrewhf3楼
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xiaogebaobao4楼
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ywj_huang5楼
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ljptp6楼
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BraveSophia7楼
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pandongzi9楼
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jevonszou11楼
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linlinhouaa12楼
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KDME13楼
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evan257117楼
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ulysessweb20楼
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天涯明月201622楼
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