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市井俗人

新虫 (初入文坛)

[求助] CATB法提取DNA时一直失败 已有3人参与

请问CATB法提取DNA时,有的材料为什么一点都跑不出来,加氯仿氯仿异戊醇去蛋白质时,上层很浓,跟其他植物提取出来的DNA上层明显不一样,随后跑电泳干干净净啥都没有,而同样的同时提取的其他植物的全都有,请问这是怎么了?
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有些植物需要对CTAB方法进行微调整。比如lignin太多了什么的
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
2楼2018-01-29 00:23:55
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市井俗人

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by drwhoknowss at 2018-01-29 00:23:55
有些植物需要对CTAB方法进行微调整。比如lignin太多了什么的

这个物种提出来的上清液DNA黏黏的,感觉混的有其他成分,其他物种的不黏,这里跟其他物种上清液区别太大,重做几次了,快疯,找不到原因。
3楼2018-01-29 10:01:31
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 市井俗人 at 2018-01-29 10:01:31
这个物种提出来的上清液DNA黏黏的,感觉混的有其他成分,其他物种的不黏,这里跟其他物种上清液区别太大,重做几次了,快疯,找不到原因。...

可能是糖类太多。查文献,看其他人用什么处理
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2018-01-29 11:09:54
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-01-31 11:57:42
往你的CTAB里面加1%PVP试试。
采菊东篱下,悠然见南山。
5楼2018-01-29 16:21:56
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lm880729

新虫 (初入文坛)

6楼2018-01-29 18:17:02
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沈彦祖128

铁虫 (初入文坛)

是糖,糖会把DNA包裹起来,像鼻涕。。。。。。
7楼2018-01-31 09:08:36
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ATGC_gogo

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

多糖含量太高,裂解前用去糖buffer清洗几次,冰浴效果好
8楼2018-02-27 17:47:10
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