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vein17

新虫 (初入文坛)

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虫号: 2260681
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专业: 高分子物理与高分子物理化

[求助] 氨甲环酸做凝血三项（APTT, PT, TT）检测没有效果

大家好，本人最近在做大鼠血浆的凝血三项（APTT, PT, TT）检测，使用样品有：生理盐水、纯水、用1%氨甲环酸溶液，1%4-氨甲基苯甲酸溶液等。
检测过程：
大鼠取血加入3.8%柠檬酸钠按体积比9:1抗凝，3000r离心10min取血浆。然后，血浆100ul与样品100ul混合，37度预热3min，然后加入也预热好的PT/TT试剂200ul，加入时开始计时，用针轻轻搅动混合液，直到有凝胶状出现时停止计时，作为PT/TT时间。

现在的问题是：
结果显示生理盐水/纯水的PT/TT/APTT时间最短，其它氨甲环酸等的时间都近似/长于它们，而且氨甲环酸浓度越高，凝固时间越长，请问这是怎么回事？

现在整个实验流程中唯一不可控的是血浆，是从别处取了离心好用干冰保存运来的。

我的猜测：原因是血浆失活。因为氨甲环酸的助凝原理是结合在纤溶酶和纤溶酶原上，从而阻止纤溶酶分解纤维蛋白，继而加速凝血时间。如果血浆失活，那氨甲环酸就起不到作用，加与不加对凝血时间没影响。

我想请问：血浆有那么脆弱么？这种运输方式是否会造成血浆内凝血酶和纤溶酶失活？或者有没有其他可能造成氨甲环酸无效的结果？本人不是学医学或生物的，怕自己想偏。诚恳求教大家~~

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