24小时热门版块排行榜    

查看: 1851  |  回复: 1

upwardkl

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:外泌体做western blot 已有1人参与

求助:从细胞中提取的外泌体,重悬在PBS液中,,如何进行western blot 检测?
回复此楼
雪霁花开,向上追求
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yxijaier

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
提取后的外泌体用PBS重悬,超离下来,最终沉淀用PBS重悬为6mg/ml。取50ul,直接加入20-30ul的RIRP-PMSF(100:1)裂解液,其余步骤同裂解细胞测蛋白一样。上机测蛋白浓度的时候,可以不加up水(或PBS)稀释十倍,而是直接加20ul的裂解上清,否则可能会浓度太低测不出来。
提供专业级ChIP-seq、ATAC-seq、MeRIP-seq、RIP-seq等表观技术服务
2楼2018-01-27 02:23:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 upwardkl 的主题更新
信息提示
请填处理意见