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茎环结构DNA的纯化
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本人刚刚接触DNA序列杂交，有些基础知识或者说实验技巧想向各位前辈学习： 我购买了一条单链DNA引物序列，包含43个碱基，其中有一部分碱基序列是互补配对的，也就是文献中通常说的茎环结构。 问题一：对茎环结构纯化步骤有很多文献说法不同，有的是95摄氏度加热5min，冰浴冷却；有的是95摄氏度加热10min，每分钟1摄氏度缓慢降至室温。不知道到底哪一种条件对茎环结构的纯化是最佳条件。 问题二：对缓冲液中MgCl2浓度的大小，有报道2mM，5mM和10mM的，究竟什么浓度是最好的。 烦请各位不吝赐教！ |
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