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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 纳米生物材料 » 考马斯亮蓝法测不出脂肪酶的浓度
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dcy丁

铜虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝法测不出脂肪酶的浓度

先根据考马斯亮蓝法做出标准曲线（以牛血清白蛋白为标准蛋白）。将脂肪酶粉末溶于tris-HCl缓冲液中，离心除去不溶部分，取上清液。将1mL 自由酶溶液加入5mL考马斯亮蓝G-250溶液，测出的OD值对应于标准曲线，其自由酶的浓度几乎为0。然后将6mL 自由酶溶液加入5mL考马斯亮蓝溶液，此时溶液明显变蓝，但测出的OD值对应于标准曲线，发现酶的浓度还是几乎为0。所以想请教一下虫友，这个可能的原因是什么呢？操作上是不是有什么不规范呢？
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1楼 2018-01-18 22:35:27
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酸奶何必呢

新虫 (初入文坛)
我也出现了同样的问题，很是头疼啊。同时我试了一下其他蛋白质依然都测不出，唯独测得出标曲时的牛血清蛋白。。不知楼主问题解决了没？！！！求回复
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2楼2018-05-24 21:53:47
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dcy丁

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 酸奶何必呢 at 2018-05-24 21:53:47
我也出现了同样的问题，很是头疼啊。同时我试了一下其他蛋白质依然都测不出，唯独测得出标曲时的牛血清蛋白。。不知楼主问题解决了没？！！！求回复

我感觉就是酶的溶解度不行
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3楼2018-05-24 22:25:36
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酸奶何必呢

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dcy丁 at 2018-05-24 22:25:36
我感觉就是酶的溶解度不行...

你后来采用了什么方法提高溶解度呢

发自小木虫IOS客户端
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4楼2018-05-24 23:24:31
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