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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » CTAB法提取RNA的原理
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虫子739

铁虫 (小有名气)

[交流] CTAB法提取RNA的原理

CTAB法提取核酸的原理中提到：“ 在浓氯化钠溶液(1～2mol／L)中，DNA 核蛋白的溶解度很大，RNA 核蛋白的溶解度很小；而在稀氯化钠溶液(0.14mol／L)中，DNA核蛋白的溶解度很小，RNA核蛋白的溶解度很大。”然而，在试剂的配置中，DNA提取液中氯化钠浓度为1.4mol／L，RNA提取液中氯化钠浓度为2mol／L。由此看出，RNA提取液是高盐，DNA提取是低盐浓度，这是否与原理相矛盾，我不能理解，望大侠们指点！谢谢！
  另外，CTAB法提取的核酸是不是都是CTAB的复合体，不是单纯的DNA或RNA？

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-11 at 16:12 ]
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1楼 2009-03-04 11:40:10
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性.
在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来.
大于0.7mol/L都属于高盐溶液；应该是复合体
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会当凌绝顶，一览众山小
2楼2009-03-04 17:19:04
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虫子739

铁虫 (小有名气)

谢了！

那用此方法提取RNA时，DNA在哪一步被去除？
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3楼2009-03-06 10:50:06
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lusyy

金虫 (小有名气)
应该是LiCl选择性沉淀中去除DNA吧
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4楼2009-03-09 18:19:13
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虫子739

铁虫 (小有名气)
但是很多提取试剂都没用到LiCl。我提RNA时用的是Takara的RNAiso提取试剂。这个方法就没用到LiCl。
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5楼2009-03-11 16:14:39
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