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xiaozhou9959

铜虫 (小有名气)

[交流] 与细胞培养相关问题的请教

我要培养的是骨髓干细胞和肝癌细胞,请问在细胞的传代培养过程中,不同规格的培养皿在培养每种细胞时,各加多少ml 的培养液较为合适?谢谢

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chong1030

银虫 (小有名气)


xiaozhou9959(金币+1,VIP+0):多谢! 3-4 12:08
100mm的培养皿加10ml培养液
2楼2009-03-04 09:30:10
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chong1030

银虫 (小有名气)


xiaozhou9959(金币+1,VIP+0):我是用培养皿培养,谢谢! 3-4 12:09
SNU-398:人肝癌细胞,培养液是1640+10mmol/LHEPES+1mmol/L丙酮酸钠+1.5g/L碳酸氢钠+10%FBS
PLC/PRF/5:人肝癌细胞,培养液是EMEM+0.1mmol/L非必需氨基酸+1mmol/L丙酮酸钠+1.5g/L碳酸氢钠+10%FBS
消化液是0.25%胰酶+0.03%EDTA
两株细胞都是贴壁细胞,SNU-398消化时需先加入1ml(25cm2)消化液,使消化液均匀覆盖瓶底后倒掉,然后再加入1ml消化液,室温放置3分钟左右,加入培养液8ml中止消化,吹打使细胞分散(动作要轻,避免气泡),再分别将细胞液各3ml加入另外两个新瓶子,添加培养液至8ml/瓶,继续培养
PLC/PRF/5消化时只需加入1ml(25cm2)消化液,使消化液均匀覆盖瓶底后静置5分钟左右,轻拍培养瓶几下,然后加入培养液,一般也是一传三,操作同SNU-398。
3楼2009-03-04 09:32:13
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xiaotongxyz

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
xiaozhou9959(金币+4,VIP+0):非常感谢! 3-4 12:10
100mm板 8-10ml
60mm板 6mL
6孔板 3ml
12孔板 1-2mL
24孔板 500uL
96孔板100-200uL
我不是一个随便的人,我随便起来不是人,哈哈
4楼2009-03-04 10:33:27
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