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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 如何判断质粒和DNA连接成功
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18434371872

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何判断质粒和DNA连接成功 已有1人参与

转化后。抽提质粒，pcr后跑胶怎么判断是否连接呢？

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1楼 2018-01-08 10:48:30
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Nitara

新虫 (正式写手)
就看是否是你目的基因的bp

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2楼2018-01-08 11:34:27
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ksws0465326

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
提取质粒，pcr验证条带大小，方法一，截取目的片段所在质粒上下游附近的引物扩增，大小是否符合。二，选目的片段上游正向引物与目的片段序列中的反向引物pcr验证大小，或目的片段中的正向引物与载体下游反向引物pcr，验证大小。另一种直接测序，相对费用较高。
赞一下 回复此楼
3楼2018-01-08 12:46:19
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Katharine_66

铁虫 (初入文坛)
菌落PCR

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4楼2018-01-08 13:06:32
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