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s850306012

新虫 (小有名气)

[交流] 酿酒酵母菌落PCR 已有7人参与

想问各位做酿酒酵母的前辈们,酿酒酵母菌落PCR做了很久,都P不出目的条带,引物没有问题,转化子在营养缺陷型平板上也长得很好,问题出在哪呢,求完整的酿酒酵母菌落破壁及PCR步骤,谢谢
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匿名


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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2楼2018-01-06 00:15:26
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


沸水煮一下,然后pcr,结果很好的

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3楼2018-01-06 12:40:41
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感觉要延期哎

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也遇到了一样的问题,想问楼主你解决了你的问题了吗?

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4楼2018-01-30 16:30:26
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Crazy cat

铜虫 (小有名气)


★ ★
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渊博震天: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-07-18 23:07:39
酵母菌落PCR最好在菌落较小时做,然后你确定菌落是否是酿酒酵母,在4度中长期放置也会影响,额,最后你把你的PCR程序发出来看看啊
5楼2018-04-10 11:14:43
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叶书舒

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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渊博震天: 金币+2, 鼓励回帖交流 2018-07-18 23:03:48
今天刚刚问了个老师,她说可以液氮冻一下,再水煮10分钟,再pcr

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6楼2018-04-10 23:49:32
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s850306012

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 感觉要延期哎 at 2018-01-30 16:30:26
我也遇到了一样的问题,想问楼主你解决了你的问题了吗?

没有解决,你有好的方法么

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7楼2018-07-18 22:28:17
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
10ul菌液+30ul 25mM NaOH,沸水10min,1ul取样PCR。酶用高保真

发自小木虫Android客户端
8楼2018-07-18 23:07:18
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感觉要延期哎

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by s850306012 at 2018-07-18 22:28:17
没有解决,你有好的方法么
...

直接买的酵母质粒提取试剂盒,直接就p出来了

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9楼2018-07-19 12:32:21
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s850306012

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 感觉要延期哎 at 2018-01-30 16:30:26
我也遇到了一样的问题,想问楼主你解决了你的问题了吗?

没有解决呢,你有好的方法么

发自小木虫Android客户端
10楼2018-07-20 09:59:21
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