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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶切奇怪的结果
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biogefart

木虫 (著名写手)

[交流] 酶切奇怪的结果

用NcoI和xhoI酶切，连接后发现NcoI位点消失了，但是基因还是连接到了载体上，哪位能有合理的解释？谢谢了。

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-13 at 12:02 ]
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闹太套
1楼 2009-03-02 18:02:33
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xmchen1015

银虫 (小有名气)
酶切后的片段所在溶液如果不是很干净，里面的核酸酶会把你的DNA降解，尤其是末端，这样你的片段连到载体上后就会缺失几个碱基。
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3楼2009-03-06 13:52:44
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崔红利

新虫 (正式写手)
酶切检验有时是很不准确的，可能是连上之后发生了突变，还是进行测序验证吧！这样最保险。
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2楼2009-03-06 13:18:24
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biogefart

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 崔红利 at 2009-3-6 13:18:
酶切检验有时是很不准确的，可能是连上之后发生了突变，还是进行测序验证吧！这样最保险。

谢谢，我的结果就是测序的
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闹太套
4楼2009-03-06 22:16:16
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biogefart

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by xmchen1015 at 2009-3-6 13:52:
酶切后的片段所在溶液如果不是很干净，里面的核酸酶会把你的DNA降解，尤其是末端，这样你的片段连到载体上后就会缺失几个碱基。

那粘性末端难道能连上吗？谢谢回复
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闹太套
5楼2009-03-06 22:16:56
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