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慢病毒稳转膜蛋白后细胞对puro敏感？
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请教大家，我目前在做一个截短体膜蛋白的稳转细胞系。构建了慢病毒质粒后，用其中表达膜蛋白的质粒直接转染目标细胞，经过流式检测，发现蛋白表达在膜上，就包装了慢病毒。 慢病毒有两个，一个是膜蛋白和rfp 融合表达，一个是单独膜蛋白。慢病毒感染后48小时加puro 筛选，这个时候就特别奇怪，单独表达膜蛋白的感染细胞筛选后全部死亡。膜蛋白和rfp融合的，有部分细胞存活，且有红色荧光。等融合表达细胞长满后，消化做流式，发现细胞90%多rfp阳性，但是膜蛋白阳性率只有2%。我现在怀疑是不是表达了膜蛋白的细胞对puro敏感呢？所以只能分选？ 谢谢大家了 发自小木虫IOS客户端 |
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