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洛神惟惟

新虫 (正式写手)

[交流] 真核载体构建

最近我要做真和表达载体构建,看了一些文献后,产生了以下几个疑问:
1、只有一少部分的文献里边是直接把目的片段连接到真核载体上边的,大部分都是先连接到原核载体再经过酶切连接到真核载体上,我就不明白为什么要多此一举呢,直接连接到真核载体不就完了吗?
2、为什么不能直接用酶来切带有目的基因片段的原核载体以及真核载体,而一定要在引物中引入酶切位点,然后再跑PCR再酶切?

哪位老师或者兄弟姐妹可以给我一些解答呀,感谢

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