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多酚纯化问题
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赵彤淡洁
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多酚纯化问题
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大神们,想问一下,我用AB-8大孔树脂纯化荞麦多酚完了上液相,液相的结果发现,我纯化后的物质竟然比纯化前的含量还少。是为什么?我的纯化方法是用100%乙醇溶解我的粗提物,然后上样,用90%洗脱的
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你洗脱顺序是不是反 了。
怎么先用乙醇溶解,最好是水悬浮吧,你溶解的时候会有很多被乙醇洗掉啊。
前面不同比例的水洗了吗?
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赵彤淡洁
2楼
2017-12-25 16:53:56
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老师,一开始溶解粗提物是应该用水悬浮吗?我的那个粗提物质是用乙醇提的,我没用不同浓度的洗脱
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3楼
2017-12-25 17:07:05
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2楼
:
Originally posted by
zinfly
at 2017-12-25 16:53:56
你洗脱顺序是不是反 了。
怎么先用乙醇溶解,最好是水悬浮吧,你溶解的时候会有很多被乙醇洗掉啊。
前面不同比例的水洗了吗?
老师,你好,我的粗提物是用乙醇提的,那你的意思是我直接用水将粗提物溶解成悬浊物,然后用不同浓度的乙醇,洗脱吗?我之前只用了一个浓度洗脱的
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4楼
2017-12-25 17:14:36
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【答案】应助回帖
不应该是水溶解后上样,吸附、水洗脱
梯度酒精洗脱,收集不同的洗脱浓缩检测么?
你用乙醇溶解,上样,相当于吸附、然后被洗脱了,多酚并没有被树脂吸附
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5楼
2017-12-28 16:47:58
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4楼
:
Originally posted by
赵彤淡洁
at 2017-12-25 17:14:36
老师,你好,我的粗提物是用乙醇提的,那你的意思是我直接用水将粗提物溶解成悬浊物,然后用不同浓度的乙醇,洗脱吗?我之前只用了一个浓度洗脱的
...
你应该去看看大孔树脂原理,如果不明白就直接去看硕士博士论文,里面有详细步骤的。
正规途径,这个是要做静态吸附和动态吸附实验的,小试,摸索吸附平衡浓度,时间及洗脱比例。
你乙醇上样,那你柱子里面之前是什么溶解?如果还是乙醇的话,估计你的样品很少吸附。
如果是水,那看你上样量多少了。如果是很少的一点到没关系。
大孔主要是除去色素,蛋白,果胶,可溶纤维等一堆极性化合物。所以要用水上样,这样你的样品能很好的吸附。
然后用不同比例去洗脱,将杂志洗脱掉以后,再用高比例乙醇洗脱。这样才是要的样品。
你直接用90乙醇,杂质和样品一起被冲下来。
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6楼
2017-12-31 12:54:01
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