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qingyu906

木虫 (著名写手)

[交流] 液相对浓度有什么要求?

最近刚接触到液相色谱,从中药里提取三萜类,用了和文献中一样的色谱条件和检测波长,可是我测的强度才20左右,基本上没洗出什么东西。文献中却能到200多,我以为是太稀,又浓缩了下,浓度为2mg/g,测的结果却和之前差不多。我用的仪器为waters600,柱子为Hypersil ODS 25μm C18柱(250 ×416mm ,5μm),文献上是Agilent Zorbax SB2C18 柱(250 ×4. 6 mm ,5 μm),各位大侠们,这究竟是什么原因啊?液相能进的最高浓度能到多少?应该不是浓度的问题吧

[ Last edited by qingyu906 on 2009-3-1 at 20:32 ]
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maxuedong

至尊木虫 (著名写手)

小木虫终身顾问

★
qingyu906(金币+1,VIP+0):弱弱地问:线性范围是个什么? 3-2 16:41
浓度在线性范围内就可以了..........
平平淡淡才是真
2楼2009-03-01 22:36:30
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sendyzhang5210

木虫 (小有名气)

★ ★
qingyu906(金币+2,VIP+0):谢谢 3-2 16:41
浓度过高会使柱子超载,但响应值也会很高的。而且通常来说,WATERS的响应数值应该是比Agilent的值要高,所以应该不是浓度的问题,如果你确信色谱条件没有问题的话,那很可能就是前处理的事。
3楼2009-03-01 22:55:00
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zhangsibao

木虫 (正式写手)

回复楼主

★ ★ ★
qingyu906(金币+2,VIP+0):多谢 3-2 16:42
qingyu906(金币+1,VIP+0):检测器的线性范围是什么? 3-5 22:50
第一、物质的峰值相应与色谱柱无关,所以只要是固定相相同相同样品色谱峰就应该相同。
第二、至于色谱峰的大小和以下因素有关:1、浓度,2、分析谱线,3、检测器灵敏度,4、检测器的输出比例。
第三、关于检测器的浓度范围只要在检测器的线性范围内就可以。
4楼2009-03-02 08:57:07
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weipingwu

金虫 (正式写手)

★ ★
qingyu906(金币+2,VIP+0):多谢 3-2 16:42
只要峰没有出现平顶(超载)的情况,你的浓度就可以!当然还要注意峰型,是否拖尾严重,是否影响到到相邻峰的分离度,一般要求在满足检测灵敏度的前提下,样品浓度低一点!
同时,不同的色谱柱检测的峰高有可能不一致!不同仪器测量的单位也不一定相同!
不经历风雨,怎能见彩虹?
5楼2009-03-02 09:04:12
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zhaojunji06

铜虫 (小有名气)

★
qingyu906(金币+1,VIP+0):多谢 3-2 16:42
不同的检测器的检测测得的值不同,不可作比较。
上样量的要求在线性范围内,浓度不可太高,过高的浓度会造成色谱柱超载,峰型拖尾。一般可参照相关同种物质的上样量。希望对你有所帮助。
6楼2009-03-02 11:11:49
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luomingyl

铜虫 (小有名气)

★
qingyu906(金币+1,VIP+0):多谢 3-2 16:43
首先要知道他的最大吸收波长,作不同浓度的线形关系,然后选择一个合适的浓度
7楼2009-03-02 12:19:29
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