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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 酵母双杂X-gal始终没有蓝斑是什么原因
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Cedesova

新虫 (小有名气)

[求助] 酵母双杂X-gal始终没有蓝斑是什么原因 已有1人参与

实验室没有阳性对照。
在SD-2 和 SD-4上长得都正常。转移到X-GAL上后有些克隆没有生长，大部分长出来还是白斑，500个克隆全是白的。试了两次，买了新的X-gal也还是长不蓝斑。
我是采用表面涂抹X-gal的方法，浓度是20mg/ml，DMF溶解。

请问X-gal没有变蓝有什么原因，几百个克隆都是假阳性也不太可能吧。
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1楼 2017-12-23 08:30:39
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kkkkk76

新虫 (小有名气)
不应该是a-x-gal吗？

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2楼2017-12-23 10:26:18
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lantian999

新虫 (初入文坛)
不是应该还要有IPTG诱导吗

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3楼2018-01-28 21:45:48
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

刚觉你的基因没有表达，或表达有问题。
你需要个阳性对照，来检测你的实验系统
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2018-01-29 11:53:19
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飞飞20075470

新虫 (初入文坛)
做酵母双杂时是需要加阴性对照和阳性对照的，你的阳性对照变蓝了没有？
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5楼2018-02-11 15:43:06
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