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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 多肽液相纯化求助 样品太疏水
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wgloveqd

金虫 (小有名气)

[求助] 多肽液相纯化求助 样品太疏水 已有1人参与

求帮助，跪谢，多肽太疏水，序列如LLWFQAIVV
反相柱C18纯化，样品粘柱很难洗脱下来，少量洗脱的也没有分离度，纯度很差。请教大神该怎么办？
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1楼 2017-12-21 16:07:29
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独钓西湖

新虫 (小有名气)
高流速，快梯度，起始浓度不要太低

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2楼2017-12-21 18:27:24
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wgloveqd

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 独钓西湖 at 2017-12-21 18:27:24
高流速，快梯度，起始浓度不要太低

这样出来的也是不合格的，峰很宽
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3楼2017-12-22 11:14:59
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独钓西湖

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wgloveqd at 2017-12-22 11:14:59
这样出来的也是不合格的，峰很宽...

一、未制备前样品纯度如何，疏水序列合成难度也大
二、你溶解的如何，是否能完全溶解
三、如果乙腈流动相洗脱差，可以考虑甲醇或异丙醇。
四、如果你要95%纯度应该能达到

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4楼2017-12-22 20:08:47
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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家

【答案】应助回帖

内容已删除
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5楼2017-12-28 11:47:44
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chaiyin1991

银虫 (小有名气)
我会换疏水性更低的填料，C8，C4或者C3都可以试一下
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愿我有生之年，得见您君临天下
6楼2018-04-01 09:06:03
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