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ALBERTOY

新虫 (初入文坛)

[求助] 为什么一组pcr有的条带亮有的暗或者没有 已有1人参与

我统一体系,0.5ul模板,1ul引物,25ulmix,22.5ul. ddh2o。  一次性跑24个样品,其中有20和左右条带很好,但是剩下4个样品条带暗或者无,更换mix以后,剩下的4个样依然无法跑出来,请问会是什么问题(这样的问题在我跑的一共100个样本有20多个样本是这种情况)求大佬帮我分析下,头都大了。

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zhoumin-09

木虫 (小有名气)

铁杆木虫

谨言慎行
2楼2017-12-21 08:30:19
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ALBERTOY

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhoumin-09 at 2017-12-21 08:30:19
得考虑下拷贝数

那应该如何改良?

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3楼2017-12-21 08:31:50
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爱学习的小洋

新虫 (著名写手)

4楼2017-12-21 08:35:24
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arthrospira

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那4个样的模板DNA有问题?
5楼2017-12-21 08:49:58
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ALBERTOY

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by arthrospira at 2017-12-21 08:49:58
那4个样的模板DNA有问题?

在提取的时候检验过浓度(一般就是几十到100多),然后就一直存在-80冰箱,(大概七月份提的)最近才拿出来用。这有没有什么问题?

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6楼2017-12-21 08:57:26
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ALBERTOY

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 爱学习的小洋 at 2017-12-21 08:35:24
或者那4浓度太低

在提取的时候检验过浓度(一般就是几十到100多),然后就一直存在-80冰箱,(大概七月份提的)最近才拿出来用。这有没有什么问题?

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7楼2017-12-21 08:57:47
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爱学习的小洋

新虫 (著名写手)

你当时能跑出来吗,还是最近才跑不出来,最起码浓度要在100左右

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8楼2017-12-21 09:09:14
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ALBERTOY

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 爱学习的小洋 at 2017-12-21 09:09:14
你当时能跑出来吗,还是最近才跑不出来,最起码浓度要在100左右

当时没跑过,但是检测浓度是最低80最高170

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9楼2017-12-21 09:24:53
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