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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 谷氨酸棒杆菌感受态/转化
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sootiey

银虫 (小有名气)

[求助] 谷氨酸棒杆菌感受态/转化

根据文献资料前后采用了四种方法制备谷氨酸棒杆菌感受态细胞，但转化一直没有阳性克隆，问题也不知道出在哪里，希望哪位大神能指教一下
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1楼 2017-12-17 14:32:29
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muscle920

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
2楼2017-12-18 22:37:17
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Lu卢卢卢

新虫 (初入文坛)
楼主你做谷棒的感受态是偏透明状，粘稠的状态的吗

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3楼2017-12-21 20:13:41
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sootiey

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by muscle920 at 2017-12-18 22:37:17
你用的什么载体呢，有一个需要注意的事项就是电转后涂布平板抗生素一般为1/3浓度。

载体用的是pK19mobsacB, 抗生素是Kan，用的是1/2浓度-25ug/ml
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4楼2017-12-25 15:23:28
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sootiey

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Lu卢卢卢 at 2017-12-21 20:13:41
楼主你做谷棒的感受态是偏透明状，粘稠的状态的吗

感受态比较浓稠，菌浓度比较高，颜色偏黄
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5楼2017-12-25 15:24:44
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糊涂蛋的日常

新虫 (初入文坛)
请问下你的感受态细胞是怎么做的呢，为什么我划线挑菌过夜试管摇后转接到锥形瓶的时候菌总是不长呢？你遇到过了吗，我用epo培养基和bhis培养基都一样，就是不长，文献说3-5小时就能长起来

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6楼2018-04-09 14:14:40
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8214

新虫 (初入文坛)
您好，我现在也遇到同样的问题了，请问您是怎么解决的呀？我们领导说按照大肠杆菌感受态的方法制备谷氨酸棒状杆菌，不知靠不靠谱啊？或者您可以提供给我一下谷氨酸棒状杆菌感受态的制备protocol或文献吗？不胜感激！！
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7楼2018-07-20 09:15:28
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