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焦倩倩

新虫 (初入文坛)

[交流] 基因组提取

求问提取基因组失败可能有哪些原因呢?
刚开始往革兰氏阴性菌里加GA未见菌液呈粘稠状,只是产生了白色沉淀,是不是菌壁没有裂解导致的?

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lm880729

新虫 (初入文坛)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-12-17 10:01:08
有可能是菌数不够吧,离心柱式的提取试剂盒不够,磁珠式的提取量也很低。溶液式的比较给力。

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2楼2017-12-16 19:56:48
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焦倩倩

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lm880729 at 2017-12-16 19:56:48
有可能是菌数不够吧,离心柱式的提取试剂盒不够,磁珠式的提取量也很低。溶液式的比较给力。

之前师兄师姐都是用的这种方法,而且离心之后,发现菌体沉淀还挺多的

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3楼2017-12-16 20:29:22
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lm880729

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-12-17 10:01:27
裂解液的问题吧!裂解不充分?加入GA要充分混匀。还有你用的试剂盒是谁家的?提取比较麻烦吧,十好几步,还得自己配几种溶液的那种,哪一步有问题最后结果都不理想!我们实验室现在都用兰瑞的,天津兰瑞。自己也不用配溶液,特别快,出来的dna浓度也高。关键是就四部操作,有问题好分析。还有,你有没加rna酶。反正我们之前用天根的就是偶尔得提不出来,可把人愁死了。

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4楼2017-12-16 21:00:31
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焦倩倩

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lm880729 at 2017-12-16 21:00:31
裂解液的问题吧!裂解不充分?加入GA要充分混匀。还有你用的试剂盒是谁家的?提取比较麻烦吧,十好几步,还得自己配几种溶液的那种,哪一步有问题最后结果都不理想!我们实验室现在都用兰瑞的,天津兰瑞。自己也不用 ...

我们用的就是天根的,没有加RNA酶,这个必须加吗,之前师兄师姐也没加哎

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5楼2017-12-16 23:14:54
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6楼2017-12-17 00:17:47
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lm880729

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1.不加是有影响的,2.天根的重复性不好。

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7楼2017-12-17 10:23:09
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