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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 一个色素的纯度分析
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gudongyu_2000

铁虫 (小有名气)

[求助] 一个色素的纯度分析

要用HPLC测定一个色素RHG的纯度，其中的杂质是EVANS BLUE(EB) ，EB和RHG都在牛血清白蛋白（BSA，670 kDa）溶液中。为了测定纯度，我们用超滤离心(30kDa的膜) 除去BSA。但发现EB和BSA结合的很紧，要除去BSA，我们试过（1）酸解离（100度水浴加热30分钟），超滤离心，结果过滤下的溶液是无色的；(2)碱解离（100度水浴加热30分钟），超滤离心，效果比酸解离好些，但滤液也是兰色很淡；（3）加甲醇，超滤离心，也不行。请问怎么才能证明EB能和BSA完全解离，测定RHG的纯度（注：RHG和BSA能解离）？
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1楼 2017-12-15 23:17:50
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柳絮虫

新虫 (职业作家)
不用分离，就检测结合物，换算成色素含量。
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2楼2017-12-16 11:59:06
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gudongyu_2000

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2017-12-16 11:59:06
不用分离，就检测结合物，换算成色素含量。

谢谢！可是结合着蛋白的EB怎么测呢？常规色谱柱直接进蛋白能行吗？
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3楼2017-12-18 22:56:45
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