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gudongyu_2000

铁虫 (小有名气)

[求助] 一个色素的纯度分析

要用HPLC测定一个色素RHG的纯度,其中的杂质是EVANS BLUE(EB) ,EB和RHG都在牛血清白蛋白(BSA,670 kDa)溶液中。为了测定纯度,我们用超滤离心(30kDa的膜) 除去BSA。但发现EB和BSA结合的很紧,要除去BSA,我们试过(1)酸解离(100度水浴加热30分钟),超滤离心,结果过滤下的溶液是无色的;(2)碱解离(100度水浴加热30分钟),超滤离心,效果比酸解离好些,但滤液也是兰色很淡;(3)加甲醇,超滤离心,也不行。请问怎么才能证明EB能和BSA完全解离,测定RHG的纯度(注:RHG和BSA能解离)?
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

不用分离,就检测结合物,换算成色素含量。
2楼2017-12-16 11:59:06
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gudongyu_2000

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 柳絮虫 at 2017-12-16 11:59:06
不用分离,就检测结合物,换算成色素含量。

谢谢!可是结合着蛋白的EB怎么测呢?常规色谱柱直接进蛋白能行吗?
3楼2017-12-18 22:56:45
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