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kkkkk76

新虫 (小有名气)

[求助] BmN细胞培养求助已有1人参与

各位老师,最近我培养的BmN细胞出现了很多问题,由于缺少经验,来这里请教。
BmN1.JPG中正常的细胞内部都是比较平整干净的,而总会有一部分细胞内部像是皱缩的,同时也有部分细胞会碎裂,并且在BmN1.1中这些内部不光滑有些皱缩的细胞都会成团聚集,不知道这是由于什么原因导致的。
前面两张图是继代后4-5天的样子,BmN2和BmN2.2则是分完后的样子,可以看到更多的细胞碎片,以及即将碎裂的细胞,同时这些碎裂的细胞基本都是那些成团聚集的细胞,这些细胞贴壁不紧,轻拍就可以掉落,同时吹打几次后就会碎裂,是不是说明这些聚集的细胞已经都是死了的细胞?出现这种现象通常都是由于什么因素导致的?请各位老师多多指教,谢谢大家了!!
对了我们在使用的是Gbico新西兰产的FBS,培养基是TC-100,最近打算换成SF900 II试试效果。

BmN细胞培养求助
BmN1.jpg


BmN细胞培养求助-1
BmN1.1.jpg


BmN细胞培养求助-2
BmN2.jpg


BmN细胞培养求助-3
BmN2.2.jpg
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kkkkk76

新虫 (小有名气)

2楼2017-12-17 09:31:23
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wellentome

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我养过一段时间BmN细胞,也是用TC-100培养基,细胞长得很慢,贴壁很紧。我通常都是按1/2传代,这样三四天就可以再传或用了,传密一点有个好处:细胞不至于长太久而局部聚团。在吹细胞时,我通常都是旧培养基去掉,新加两毫升培养基进去来回几下吹掉某一区域的细胞,移出来,再2ml吹另外一区域的细胞,再2ml...再2ml...这样分多次吹一瓶细胞,每颗细胞并不会受到太大机械损伤,碎片也会少一些。如果还是嫌细胞碎片多,可以等细胞贴壁后,更换培养基。我的感觉是,传BmN细胞,得有耐心。
3楼2017-12-18 14:05:15
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