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xbburton

至尊木虫 (小有名气)

[交流] 应回收哪条带

做质粒双酶切(切除目标片段)后,将其与酶切前质粒一同电泳,结果切出的大片段位于酶切前质粒的两条带之间,而原有的质粒的两条带依然存在(大条带变暗,小条带亮度与酶切前相似),请高手指点出现此现象的原因,此外,我是否应该回收位于这两条带之间的片段呢?

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-9 at 12:00 ]
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caoqishu

铜虫 (初入文坛)


肯定是没有切完全啊
3楼2009-03-17 17:15:40
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

肯定是没切干净~~用NEB的酶一般就不会出这问题
一般而言,无需跑胶回收,直接用PCR产物纯化试剂盒洗一下就好了(我用MN的有个buffer可以自己调浓度回收不同长度的片段,这点比QIAGEN的人性化很多,呵呵)
2楼2009-02-27 18:29:03
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