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王森岩

金虫 (小有名气)

[求助] 各位大神，能否帮助一下 ，pH 7.8的磷酸缓冲液（含0.2 mM的EDTA和2%的PVP）该如何配？

50 mM pH 7.8的磷酸缓冲液（含0.2 mM的EDTA和2%的PVP），经过查看资料已经配到这一步，下面的2%PVP实在不知道该如何配制了,请各位大神赐教！

① 50 mM pH 7.8的磷酸缓冲液（含0.2 mM的EDTA和2%的PVP）配制如下：
② A液：0.2M的NaH2PO4溶液  称取分析纯NaH2PO4•2H2O  31.21克，用蒸馏水定容至1000毫升。
③ B液：0.2M的Na2HPO4溶液  称取分析纯Na2HPO4•12H2O  71.64克，用蒸馏水定容至1000毫升。）
④ 0.05M 磷酸缓冲液（PH=7.8）：A液21.25ml+B液228.25ml定容至1000ml;
⑤ 0.2 mM的EDTA：取0.0744g EDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml，棕色瓶避光保存；
⑥ 2%的PVP：  ?????
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1楼 2017-12-12 18:00:38
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
1000毫升就是1000克，乘以2%，就是20克。称20克PVP加进去摇匀。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2017-12-13 11:32:44
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王森岩

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2017-12-13 11:32:44
1000毫升就是1000克，乘以2%，就是20克。称20克PVP加进去摇匀。

你好，感觉不太对啊，1000毫升不全部是蒸馏水，所以1000毫升应该不是1000g吧？
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3楼2017-12-13 21:20:44
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王森岩

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 王森岩 at 2017-12-13 21:20:44
你好，感觉不太对啊，1000毫升不全部是蒸馏水，所以1000毫升应该不是1000g吧？...

2%的PVP：取20.7569g PVP，用 0.2 mM的EDTA 溶液定容至1000ml，棕色瓶避光保存
请问这样算对吗？
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4楼2017-12-13 21:26:36
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王森岩 at 2017-12-13 21:26:36
2%的PVP：取20.7569g PVP，用 0.2 mM的EDTA 溶液定容至1000ml，棕色瓶避光保存
请问这样算对吗？...

只是一个缓冲溶液而已，没必要这么精确。

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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
5楼2017-12-13 21:34:06
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王森岩

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by archbishop at 2017-12-13 21:34:06
只是一个缓冲溶液而已，没必要这么精确。
...

谢谢，开始做酶，没啥经验。
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6楼2017-12-15 18:53:15
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
6楼: Originally posted by 王森岩 at 2017-12-15 18:53:15
谢谢，开始做酶，没啥经验。...

缓冲溶液的特点就是在加入少量强酸强碱或者体积在一定范围内改变时维持ph基本不变，所以你算那么精确没用，两种盐也没必要分开配。事实上你不可能精确计算，就比如盐的溶解会对体积有微小的影响，虽然定容到1000毫升，水的质量肯定不是1000克，所以溶液的质量没法精确计算，也就没法精确计算2%是多少。如果你担心ph不准，可以配完之后再加酸或碱调整。只要每次调的ph一致，就可以保证实验的一致。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
7楼2017-12-15 19:11:08
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王森岩

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by archbishop at 2017-12-15 19:11:08
缓冲溶液的特点就是在加入少量强酸强碱或者体积在一定范围内改变时维持ph基本不变，所以你算那么精确没用，两种盐也没必要分开配。事实上你不可能精确计算，就比如盐的溶解会对体积有微小的影响，虽然定容到1000毫 ...

非常感谢！
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8楼2017-12-17 17:05:49
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