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yingjun.z

[交流] 请教分子生物学和生物化学的两道题目

1、(ddCTP和dCTP的结构示意图),给出在DNA复制反应中,(1)如ddCTP的浓度远大于dCTP,会怎样?为什么?(2)前者浓度只有后者的10%,会怎样?为什么?(3)dCMP的浓度远大于dCTP或只有其10%会怎样?为什么?

2.一个载体,上有Pst I,EcoR I两个酶切位点,四环素抗性标记,和复制起点,总长为4061bp,用Pst I切割载体和要插入的目的片段再连接,问(1)长出的菌落都是重组子吗?怎么鉴别?(2)挑取三个重组质粒,分别用EcoR I切割,跑琼脂糖电泳后得到如下条带,已知载体上EcoR I与Pst I之间相距750bp,目的片段上有一EcoR I酶切位点,距其中一端250bp, L1 L2 L3 Marker --- 5000 --- --- --- --- 3000 --- --- --- 1500 --- --- 1000 --- --- 500 问,1,2,3泳道的差别是怎么造成的?
3.转录后加工?有人认为“转录后加工并不确切”,你怎么认为?
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

1、(1)如ddCTP的浓度远大于dCTP,会得到一些小片段,原因是ddCTP加上去复制无法继续。(2)前者浓度只有后者的10%,很可能得到全长序列,同时得到一些小片段,原因同上,但是加ddCTP的几率低很多了。(3)dCMP加上去也不能继续复制,因为DNA聚合酶催化的反应需要能量,而能量来源于NTP的两个高能磷酸键的水解。
2、长出的菌落不一定都是重组子,鉴别方法比如酶切电泳、测序都可以。
2楼2009-02-27 16:33:49
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yingjun.z

3楼2009-03-01 22:55:02
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