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feifeimf

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】 过氧化氢酶活性检测

请问,用紫外可见吸收法怎么测定过氧化氢酶的活性呢?具体步骤是什么?

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雨露沉香

金虫 (小有名气)


feifeimf(金币+1,VIP+0):谢谢你。可是我的双氧水没有峰,请问你的是在哪里买的? 2-27 14:55
过氧化氢酶
紫外吸收法:H2O2在240nm波长下有强吸收,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度随反应时间增加而降低。根据测量吸光度的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。
2楼2009-02-27 14:42:53
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feifeimf

银虫 (小有名气)

补充一下:我查的文献也是这样说得,可是我新买的30%的过氧化氢,国产分析纯,为何就没有峰呢?是双氧水的问题吗
百思不得其解,请问大家的双氧水都是在哪里买的?
3楼2009-02-27 14:54:42
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雨露沉香

金虫 (小有名气)


feifeimf(金币+1,VIP+0):我就是检测酶的活性,其他什么也没有,才买的双氧水啊,我买的是国产的 2-27 16:08
做这个试验的时候双氧水一定要是现买现用

另外不知道你处理的样品是什么方面的

样品的处理方式对试验的结果也有很大的影响
4楼2009-02-27 15:05:00
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kuanbinger

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
feifeimf(金币+1,VIP+0):请问这个试剂盒贵吗?我是做化学的,不太懂这方面 2-27 16:20
feifeimf(金币+2,VIP+0):非常感谢!谢谢你! 3-1 14:35
这个有特定的试剂盒,你找生物试剂公司问一下,拿试剂盒说明书操作就好了。我做过,详细的过程忘记了,不过好像就是分解过氧化氢的速度紫外吸收改变不同的原理测定的,测定的时候加过试剂立即测定吸光度,秒表记时,n秒后再记录一次吸光度,根据差值计算分解过氧化氢速率,计算含量的。
5楼2009-02-27 15:33:30
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120101405

铁杆木虫 (正式写手)


feifeimf(金币+1,VIP+0):谢谢你,这个方法说得很仔细,可是我的双氧水在240nm处没有吸收 2-27 18:15
http://gshow.gsau.edu.cn/test/zhwshlx/pages/shiyan/20.htm
上去看看
操作原理方法
步骤都很详细
谦逊求教才能更进一步
6楼2009-02-27 17:09:14
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zhhl2981

木虫 (职业作家)

到百度看看
7楼2009-02-27 18:39:45
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feifeimf

银虫 (小有名气)

谢谢各位热心的朋友,
检测的方法我已经查到了,现在遇到的问题是我的双氧水在240nm处没有吸收峰,新买的,而且测过很多次都没有。所以实验继续不下去了
不知有没有朋友遇到过这种情况,不知道原因出到哪里了
8楼2009-02-27 21:52:14
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keliernuo

铁杆木虫 (正式写手)

不会比色皿拿错了吧?
呵呵
我从小很刻苦,晚上就着萤火虫看书——白天尽忙着逮了。
9楼2009-02-27 22:05:49
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kuanbinger

木虫 (著名写手)

哈哈,可能原因如下:
1.你的过氧化氢质量不合格
2.紫外分光光度计坏了
3.比色皿拿错了,石英和玻璃的要分清
4.样品浓度太高或太低,注意调零。
5.仪器使用方法错误。==
   我在给你留言里说了些东西,请看看,希望有所帮助。
10楼2009-02-28 09:42:15
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