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meZXJ

新虫 (小有名气)

[交流] 请问我想构建一个共表达载体,给每个基因添加rbs序列,可以添加pet上的rbs序列吗? 已有2人参与

谢谢大家,谢谢

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莫落

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以的,其实不用构建的,有相应的共表达载体,比如pRSFDuet

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2楼2017-12-10 20:42:27
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meZXJ

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 莫落 at 2017-12-10 20:42:27
可以的,其实不用构建的,有相应的共表达载体,比如pRSFDuet

但是,我想都插到pet载体上,我不知道怎么设计引物,把载体上的rbs怎么加到引物上,rbs和我的目的片段起始密码子需要隔多少个碱基呢?
请问我想构建一个共表达载体,给每个基因添加rbs序列,可以添加pet上的rbs序列吗?



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3楼2017-12-10 20:51:53
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meZXJ

新虫 (小有名气)

引用回帖:
1楼: Originally posted by meZXJ at 2017-12-10 19:06:18
谢谢大家,谢谢

各位大神们

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4楼2017-12-11 08:19:56
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meZXJ

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 莫落 at 2017-12-10 20:42:27
可以的,其实不用构建的,有相应的共表达载体,比如pRSFDuet

感激不尽

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5楼2017-12-11 08:20:34
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莫落

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可以参照其他共表达载体构建啊,找到序列,看看位置是怎样的

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6楼2017-12-11 11:35:52
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meZXJ

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 莫落 at 2017-12-11 11:35:52
你可以参照其他共表达载体构建啊,找到序列,看看位置是怎样的

找了,文献里没有写太具体的方法,谢谢,太谢谢你了。

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7楼2017-12-11 11:37:05
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xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
统计数据显示洗菌rbs到基因起始密码子间隔5-9个碱基。

rbs附近的碱基,甚至包括上游基因的3’端和下游基因的5‘端序列,对转录后的mRNA与核糖体结合都有较大关系,影响翻译效果的。

建议先单独表达,验证某载体上的rbs对你的基因可用再串联试试。
8楼2017-12-12 09:07:06
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meZXJ

新虫 (小有名气)

9楼2017-12-13 13:00:08
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