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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求大神带！酵母真核表达质粒线性化酶的选择
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周周Juaner

新虫 (初入文坛)

[交流] 求大神带！酵母真核表达质粒线性化酶的选择 已有3人参与

利用酵母X-33构建真核表达时，质粒选择的是pPICZaA，前期扩增目的片段时，酶切位点选择的是Sal1，目的基因又中含有Sacl1内切酶，请问做质粒线性化时还能选Sal1吗？如不能，还有哪些酶可以选？初次接触表达，不是很懂，麻烦大家帮忙解答，求大神带。谢谢啦～

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1楼 2017-12-06 22:49:28
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zhxian

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，可以和你换点载体不？

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2楼2018-12-28 00:27:47
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可选择的线性化位点有：1、Sac I；2、Pme I；3、Bst X I三个，如果序列内部有Sac I的话就不能再选了。剩下两个你看看目的基因里边有没有。
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    • 2018-12-28 12:19:15, 505.66 K

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

15052123882
3楼2018-12-28 12:19:17
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15052123882

新虫 (初入文坛)
您好！

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4楼2019-03-29 00:17:10
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15052123882

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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引用回帖:
3楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-12-28 12:19:17
可选择的线性化位点有：1、Sac I；2、Pme I；3、Bst X I三个，如果序列内部有Sac I的话就不能再选了。剩下两个你看看目的基因里边有没有。

您好！请问您们用pPICZaA这个载体，长出来的转化子，后期还用博莱霉素抗性梯度筛选吗，像9K载体G418筛选高拷贝那样的，刚开始做，不太懂，想请教下大家

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5楼2019-03-29 00:20:25
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