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200728003008048

至尊木虫 (职业作家)

[交流] 培养的细胞污染了,大家给看看吧。

我培养的细胞发生污染了,但是不知道是什么东西。
在倒置相差显微镜下物镜*40下可以观察到有黑色的小点在蠕动,仔细观察好像是在不停地扭动着。我的培养液是新配的,所用的滴管也是刚消毒不久,细胞是刚复苏的。
我们的细胞实验室是08年下半年刚建的,是JS-CZ型装配式洁净室。所用的培养箱是国产的,水箱恒温式。二氧化碳是通过流量计的调控通入培养箱的。我自己怀疑是通入的二氧化碳没有经过过滤造成的,而且我们的二氧化碳钢瓶不是做细胞培养用的,是本来用作化学实验的高纯二氧化碳钢瓶。不知道这又没有关系。
希望高手们给分析分析,看看我哪里除了问题,同时也给指导一下整个实验室的消毒方法(就我的实验条件)。非常感谢哦。
培养细胞最令人头疼的事就是细胞污染,况且我对此又是一窍不通,希望大家给我些经验之谈,如果是从整个细胞实验室的消毒,维护谈起,那将是再好不过的了。
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showzoo

银虫 (小有名气)

3楼的师兄说得对 是的是黑胶虫污染
如果是特别珍贵的细胞可以尝试用双抗冲击法试试
如果还能找到的细胞就尽早丢掉 在对环境和器皿还有试剂逐个进行排除染菌的可能
环境和培养箱都用84消毒就行了 co2放心 要说绝对无菌是不可能的 就是培养箱打开的时候和外面的空气对流也有菌啊!肯定不是co2的过
7楼2009-02-27 12:56:27
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

先看看是不是培养基污染吧
滤完培养基一般都要吸一点出来到小皿里头培养个两三天看看会不会长东西
3楼2009-02-26 19:16:16
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lovewisdom

铜虫 (小有名气)

我的细胞最近也被污染了,跟LZ描述的类似,师兄说是黑胶虫,据说可能是FBS里面的
4楼2009-02-26 19:21:43
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bone0611

二氧化碳没有关系。我们实验室也用的普通的钢瓶。但我们在进气口这里加了一道过滤。另外,提醒一下,实验室的整体环境是不是好。
5楼2009-02-26 22:04:04
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