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yhy1980

新虫 (小有名气)

[交流] 关于PCR仪问题

求助各位大虾:我设置的PCR程序大概要1.45小时,可是运行完要2.30小时,请问是不是PCR仪有问题了?PCR仪升温速度会影响扩增效果吗?
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蓝色基因

金虫 (正式写手)

不知道你是怎么算运行1.45 小时的,PCR过程中变性,退火,延伸中间温度变化也是需要时间,等温度到了才开始计时运行程序。所以PCR的时间不仅仅是几个程序时间相加而已。
2楼2009-02-26 16:44:11
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yhy1980

新虫 (小有名气)

谢谢,是整个循环下来大概要1个多小时,但是,以前做试验的时候,就同样的程序运行不超过2个小时,现在却要2.30小时,还有,PCR仪会发出很刺耳的吱吱声
3楼2009-02-26 17:00:45
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jasco

木虫 (正式写手)

说明你现在用的机器升降温速度比较慢,看看是不是可调,不可调就没办法了。
4楼2009-02-26 17:14:23
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lufuhao

木虫 (著名写手)

极品木虫

你可以看看你的PCR仪进行一个循环实际需要多长时间,如果实际一个循环时间*循环次数与实际PCR完成时间相差甚远,那肯定是出问题了!再者,看一下升降温的速度!

有4度保温么,是不是连那个时间也算上了!
将心比心
5楼2009-02-26 18:04:33
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