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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 关于连不上T载的问题
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lululala1212

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于连不上T载的问题 已有3人参与

胶回收产物条带基本正确，但是连T载长的菌都没有阳性，感受态用的自己实验室师姐做的DH5a，检测过了也没问题，一板长了二三十个菌可是就是没有阳性，而且长的菌也不是乳白色乳黄色的那种，是有点透明的水水的菌，请问是哪里出了问题吗

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1楼 2017-11-30 19:07:21
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就是柚子啊！

新虫 (正式写手)
我上次好像也是没连上，都挑不出单菌落，菌落pcr还都有条带！特别怀疑也是连T没连上

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3楼2017-11-30 19:21:03
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就是柚子啊！

新虫 (正式写手)
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5楼: Originally posted by lululala1212 at 2017-11-30 20:52:29
我就是做完连接转化，然后涂amp板，挑单菌落，做单菌落检测，跑pcr结果是除了引物二聚体之外什么条带都没有
...

就是跑条带都是最下面的么？我的片段可小，用两千的marker，妈的都看不出来

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6楼2017-11-30 21:00:36
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就是柚子啊！

新虫 (正式写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
怎么判断没有阳性的？

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2楼2017-11-30 19:19:40
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lululala1212

新虫 (初入文坛)
我就是做完连接转化涂amp板，然后做菌落pcr，完了跑胶检测，跑出来的除了引物二聚体什么条带都没有

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4楼2017-11-30 20:49:43
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lululala1212

新虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by 就是柚子啊！ at 2017-11-30 19:21:03
我上次好像也是没连上，都挑不出单菌落，菌落pcr还都有条带！特别怀疑也是连T没连上

我就是做完连接转化，然后涂amp板，挑单菌落，做单菌落检测，跑pcr结果是除了引物二聚体之外什么条带都没有

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5楼2017-11-30 20:52:29
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lululala1212

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 就是柚子啊！ at 2017-11-30 21:00:36
就是跑条带都是最下面的么？我的片段可小，用两千的marker，妈的都看不出来
...

我八百多的条带，可是就是没有啊很难过，实验一点进展都没有，找不到原因在哪

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7楼2017-11-30 21:05:00
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就是柚子啊！

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7楼: Originally posted by lululala1212 at 2017-11-30 21:05:00
我八百多的条带，可是就是没有啊很难过，实验一点进展都没有，找不到原因在哪
...

问老师了么？怎么说的？

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8楼2017-11-30 21:07:09
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lululala1212

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 就是柚子啊！ at 2017-11-30 21:07:09
问老师了么？怎么说的？
...

还没问，老师有点凶...明天汇报实验进展再问

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9楼2017-11-30 21:14:50
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就是柚子啊！

新虫 (正式写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by lululala1212 at 2017-11-30 21:14:50
还没问，老师有点凶...明天汇报实验进展再问
...

加个好友，随时交流下？我是女的

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10楼2017-11-30 21:15:26
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