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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNA提取总是降解
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欣晴5832

金虫 (小有名气)

[交流] DNA提取总是降解

以前提DNA的时候效果都比较好，可从去年冬天开始就总是降解，不知道为什么，植物材料均为一个属的，提取过程中混匀的时候都比较轻，还有什么该注意的事项呀？请各位指教！谢谢！
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1楼 2009-02-25 17:03:49
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
建议把你降解的DNA凝胶电泳图片发上来，这样便于分析
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会当凌绝顶，一览众山小
2楼2009-02-25 17:48:00
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tuziluojie

银虫 (小有名气)
★
欣晴5832(金币+1,VIP+0):谢谢 2-28 20:45
降解大部分都是温度的问题吧，或者是振荡太过剧烈，双链解开了？
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3楼2009-02-25 17:55:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
有可能是buffer不新鲜了
其实提DNA这么常规的为何不用试剂盒？
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4楼2009-02-25 18:01:19
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zqt123_1981

木虫 (小有名气)
最好用新鲜的植物材料。或者是超低温保存的。我提过在-20保存的植物新鲜材料讲解的也很厉害
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5楼2009-02-25 19:43:53
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
buffer应该没有问题，跑其他样品的时候都很好
我的植物材料一直保存在-80°C冰箱
我想还是先用传统的方法试一下，实在不行再用试剂盒吧，关键是以前一直提的很好，请问有没有什么可以改进的方法或者需要特别注意的问题？谢谢！

[ Last edited by 欣晴5832 on 2009-2-25 at 23:07 ]
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6楼2009-02-25 22:31:53
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annwt

木虫 (正式写手)
提植物DNA关键是研磨，一定低温，研磨时温度升高很快，就把DNA降解了，注意加液氮就可以了，其它巯基乙醇都意义不大。
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7楼2009-02-26 07:34:06
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wuchuqiu

铁虫 (小有名气)
你的试剂是新鲜的还是放了很久，建议你排查下
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8楼2009-02-26 09:32:59
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shenye.judy

木虫 (正式写手)
如果以前好（一样材料），现在不好，很可能是试剂的问题。
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9楼2009-02-26 09:42:38
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
材料不太一样，都是冷冻的植物干样，试剂是新配的，也有几个样提的还可以，所以应该能排除试剂的问题，研磨时也是用液氮。
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10楼2009-02-26 19:53:34
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