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二次PCR无法扩增 已有1人参与
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这个2000BP的片段一直是我们P不出来的，我偶然一次P出来了一条很亮的带，之后酶切切胶回收 然后连接一直连不上，做了二次PCR，用的第一次的前引物和目的片段的后引物，P出来的是很长一条暗淡的带 我这是假阳性还是我的片段降解了 我的前后引物Tm值是64和71，PCR用的57°C，后面也一直P不出来了 时间设置是95℃5min 95℃30S 57℃30S 72℃1min20s,72℃10min,感觉也没什么问题，但是第一次之后就再也P不出来了 加了DMSO  |
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