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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 重组毕赤酵母菌落pcr条带不正确
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贪恋尘世

新虫 (正式写手)
引用回帖:
41楼: Originally posted by 紫月清风2012 at 2017-11-29 16:00:00
麻烦问下，你的毕赤酵母最高培养温度多少就会死亡，不再生长。

我记得是超过32度就不利于生长，50度左右死亡吧

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53楼2017-11-30 13:58:20
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风中的许诺

银虫 (正式写手)
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54楼2017-11-30 16:03:38
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匿名

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57楼2017-11-30 19:52:58
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贪恋尘世

新虫 (正式写手)
引用回帖:
57楼: Originally posted by kentyu at 2017-11-30 19:52:58
酵母一般用电转效果好一些
...

我就是用电转啊

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61楼2017-11-30 21:15:28
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匿名

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贪恋尘世
72楼2017-12-01 15:11:44
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839906335

新虫 (初入文坛)
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我最近也出现了这个问题，测序也测不出来

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73楼2017-12-01 15:46:28
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含笑少年。

新虫 (初入文坛)
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我之前也遇到过，菌P有条带，大小也对，但测序就是没信号，后来发现是我的质粒不纯，平板划线了几次，纯化了质粒，后来好了，你也可以试试，纯化一下质粒。

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贪恋尘世
74楼2017-12-01 15:47:21
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匿名

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75楼2017-12-01 16:06:16
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贪恋尘世

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引用回帖:
72楼: Originally posted by kentyu at 2017-12-01 15:11:44
前面有人提到，酵母细胞壁厚，简单的煮沸不能使其裂解，我觉得了一挑几个单克隆摇菌提质粒验证，因为用验证过的质粒做转化成功率还是比较高的。我问别人找载体，给我的是质粒，我就先做个转化，保存起来，用的时候 ...

谢谢您，我下载了感觉很实用

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76楼2017-12-01 20:39:03
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贪恋尘世

新虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
74楼: Originally posted by 含笑少年。 at 2017-12-01 15:47:21
我之前也遇到过，菌P有条带，大小也对，但测序就是没信号，后来发现是我的质粒不纯，平板划线了几次，纯化了质粒，后来好了，你也可以试试，纯化一下质粒。

请问是把平板上的酵母菌纯化吗？

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77楼2017-12-01 20:40:00
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含笑少年。

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
77楼: Originally posted by 贪恋尘世 at 2017-12-01 20:40:00
请问是把平板上的酵母菌纯化吗？
...

不是，是你质粒的菌种，我的菌之前在-80冻了好久。。把你保存质粒的菌种划几次线，纯化一下，应该管用。

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78楼2017-12-02 09:59:53
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鱼鱼昱昱

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by 飞翔之翼98 at 2017-11-26 23:17:44
目的基因引物有两条和一条的可能，根据你筛选的转化子

请问是为什么会出现有两条条带和一条条带的情况呀？
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79楼2019-12-01 19:55:24
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10652342851楼
2017-11-30 13:23   回复  
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shuwenhe52楼
2017-11-30 13:36   回复  
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anrjt80655楼
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瞧刺sa56楼
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tzynew58楼
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tybwkk48759楼
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ygjrtp8662楼
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svjdt05163楼
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tatur84364楼
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心随风飞201765楼
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淡然云霞67楼
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飞扬的沙粒68楼
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cgsjcg1069楼
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xiaoxiaosten70楼
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