24小时热门版块排行榜    

查看: 2196  |  回复: 5

jinnini125

木虫 (小有名气)

[交流] 测序都对了,酶切验证大小不对…… 已有3人参与

有一个重组质粒,我送去测序的结果都对了,可双酶切后,总是载体大小和片段大小都不对。请问一下这是怎么回事?

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

still2008

至尊木虫 (著名写手)

破碎世界的守护者


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
怎么验证的“载体大小和片段大小都不对”?

发自小木虫IOS客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

有时一本正经,有时胡言乱语。
2楼2017-11-26 15:52:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinnini125

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by still2008 at 2017-11-26 15:52:29
怎么验证的“载体大小和片段大小都不对”?

你好,是这样的。如图所示,marker是从上到下8000.5000.3000.2000.1000.750.500.300.150。带1和带2是启动子的不同长度的片段,条带1是插入2000的长度,带2是插入了1600的长度。酶切图按理说应该是除了插入片段大小不同,其余差不多才对。空载体大小是14758呢……
测序都对了,酶切验证大小不对……



发自小木虫IOS客户端
3楼2017-11-26 16:20:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-11-29 07:50:41
酶切出的目的片段大小应该没问题吧,你是觉得载体可能有问题,两个载体的大小差距有点大。我估计你测序也只是测的目的片段吧,如果是这样,那确实有可能左边的载体有问题。你可以再做酶切验证一下,找载体上的酶切位点,切两个载体和空载体(如果有图谱的话),看看是否符合预期。

发自小木虫Android客户端
4楼2017-11-26 20:04:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

still2008

至尊木虫 (著名写手)

破碎世界的守护者


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
以测序结果为准。载体结构(线状?环状?)也会影响它电泳的迁移速度。

发自小木虫IOS客户端
有时一本正经,有时胡言乱语。
5楼2017-11-28 19:34:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Julytan

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
正常酶切连接后以测序为准,线型和环型电泳速率不一样,环型跑的快

发自小木虫Android客户端
6楼2019-09-28 09:58:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jinnini125 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 9zw1gfyi7x 2026-08-01 8/400 2026-08-01 18:50 by Kddn1pB6pAzX
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 9zw1gfyi7x 2026-08-01 9/450 2026-08-01 18:43 by Kddn1pB6pAzX
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 9zw1gfyi7x 2026-08-01 6/300 2026-08-01 18:37 by Kddn1pB6pAzX
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 9zw1gfyi7x 2026-08-01 6/300 2026-08-01 18:37 by Kddn1pB6pAzX
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 9zw1gfyi7x 2026-08-01 8/400 2026-08-01 18:31 by Kddn1pB6pAzX
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 9zw1gfyi7x 2026-08-01 8/400 2026-08-01 18:31 by Kddn1pB6pAzX
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 9zw1gfyi7x 2026-07-31 9/450 2026-08-01 18:23 by Kddn1pB6pAzX
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 9zw1gfyi7x 2026-07-31 8/400 2026-08-01 18:22 by Kddn1pB6pAzX
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 9zw1gfyi7x 2026-07-31 10/500 2026-08-01 18:20 by Kddn1pB6pAzX
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 9zw1gfyi7x 2026-07-31 9/450 2026-08-01 18:11 by Kddn1pB6pAzX
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 9zw1gfyi7x 2026-07-31 9/450 2026-08-01 18:10 by Kddn1pB6pAzX
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 9zw1gfyi7x 2026-07-31 10/500 2026-08-01 18:03 by Kddn1pB6pAzX
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 jzg3xk1po8 2026-07-31 12/600 2026-08-01 17:50 by Kddn1pB6pAzX
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 jzg3xk1po8 2026-07-31 9/450 2026-08-01 17:43 by Kddn1pB6pAzX
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 jzg3xk1po8 2026-07-31 12/600 2026-08-01 17:43 by Kddn1pB6pAzX
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 7/350 2026-08-01 17:42 by Kddn1pB6pAzX
[有机交流] 产物和副产物价值比较 30+4 小汤02 2026-07-27 5/250 2026-07-30 12:44 by czyzsu
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 11/550 2026-07-29 05:50 by drbart
[基金申请] 同事接到电话了,我却没有 +4 1234567wang 2026-07-27 4/200 2026-07-28 10:11 by GOODLUCKER
[分析] 水蒸气蒸馏法乳化现象 +3 月光娇娇 2026-07-26 3/150 2026-07-26 23:25 by caiyun
信息提示
请填处理意见