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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 胶回收试剂盒原理的一个问题
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yippee_jiang

新虫 (小有名气)

[求助] 胶回收试剂盒原理的一个问题 已有1人参与

胶回收试剂盒最后一步为什么加ddH2O可以洗脱DNA，而DNA在binding buffer中却不会被洗脱？如果胶回收产物再过一遍柱子会不会直接就离心到下面的ep管了？
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1楼 2017-11-26 13:08:24
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齐明花816

新虫 (初入文坛)
我没记错的话，好像是DNA可以溶于ddH2O中，所以可以洗脱DNA,而binding buffer是用于促进凝胶溶解的

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2楼2017-11-26 13:13:58
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
binding意思就是buffer里有东西能促进DNA和buffer结合

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3楼2017-11-26 13:27:14
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iatyh

铁杆木虫 (著名写手)

金虫
在一定的buffer体系dna结合柱子的亲和力很高，相反直接用水会降低亲和力所以会直接将dna洗脱出来。相反如果你再将dna混入binding buffer依然会结合到柱子上！总之跟体系环境有关。

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4楼2017-11-26 20:04:57
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yippee_jiang: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2017-12-01 08:57:59
binding buffer中有高盐，60%-80%的乙醇或一定MOL浓度以上的高盐都会夺取DNA四周的水分子，使DNA难融与水，吸附于离心柱的硅胶模上。所以当用ddH2O洗脱时，DNA四周水分子量增加，就溶解下来了。
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采菊东篱下，悠然见南山。
5楼2017-11-27 16:43:15
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781055707

木虫 (著名写手)
你把胶回收产物再过一遍柱子，因为是水，60%-80%的乙醇或一定MOL浓度以上的高盐都没有，所以就会直接离心到下面的ep管。
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采菊东篱下，悠然见南山。
6楼2017-11-27 16:46:45
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yippee_jiang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 781055707 at 2017-11-27 16:43:15
binding buffer中有高盐，60%-80%的乙醇或一定MOL浓度以上的高盐都会夺取DNA四周的水分子，使DNA难融与水，吸附于离心柱的硅胶模上。所以当用ddH2O洗脱时，DNA四周水分子量增加，就溶解下来了。

谢谢，有帮助！

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7楼2017-12-01 08:59:38
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