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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 想给大肠杆菌扫个电镜
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似水含笑

新虫 (正式写手)

[求助] 想给大肠杆菌扫个电镜 已有1人参与

如题，怎么在干燥前处理细菌？

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1楼 2017-11-25 09:44:30
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北有山

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小冀-: 金币+3, 鼓励回帖交流 2018-01-15 17:27:13
我之前做的是青海弧菌，先摇瓶摇到对数生长期，离心收集后再用2.5%戊二醛固定12h，用磷酸缓冲液清洗三次，常温4000r/min15分钟，再用小纸包装着进行酒精梯度脱水，每次脱大概五分钟。 我以为会成粉末，最后做完了像屎糊糊一样，然后拿去冷冻干燥了六七个小时，第二天扫的电镜，还不错。 以上方法来自文献和我实验的经历，希望有帮助喔

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2楼2017-11-27 20:39:05
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似水含笑

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北有山 at 2017-11-27 20:39:05
我之前做的是青海弧菌，先摇瓶摇到对数生长期，离心收集后再用2.5%戊二醛固定12h，用磷酸缓冲液清洗三次，常温4000r/min15分钟，再用小纸包装着进行酒精梯度脱水，每次脱大概五分钟。 我以为会成粉末，最后做完了像 ...

蟹蟹

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3楼2018-01-15 17:03:28
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lark001

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 似水含笑 at 2018-01-15 17:03:28
蟹蟹
...

如果做扫描电镜，前面步骤同2楼所言，但菌株在酒精梯度脱水后，一般用临界点干燥，电镜室会有配套的临界点干燥设备，没有此设备，冷冻干燥也可以，然后再喷金处理，最后上电镜观察。希望试验取得预期效果。
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4楼2018-01-17 10:56:52
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