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沐浴阳光

新虫 (初入文坛)

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各位虫友:请问你们有从组织中提取蛋白,进行WB实验的吗?
我们从来没有进行过,第一次,我在百度文库以及这个论坛中,发现步骤:
1. 用液氮研磨组织(所需要的工具都在液氮中冰浴)
2. 称取1mg组织加入6ul裂解液
3. 震荡后放入冰盘,加完后放在摇床上孵育1h
4.离心取上清,即需要的蛋白。
想知道这几个步骤完善吗,还有这个裂解液应该是强效的还是保持蛋白活性的。
如果用于WB实验,是不是没有关系的呢,没有做过,不太懂
谢谢虫友们的帮助
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chaosyw

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
推荐一篇wb操作方面的综述供参考吧:
https://www.labome.com/method/We ... s-and-Reagents.html
另外你要选择购买时也可以参考www.labome.com这个网站,可以看各大公司抗体在sci中的报道情况
2楼2017-11-25 08:55:53
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