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37℃夏天

新虫 (正式写手)

[交流] 需要鸡汤

质粒总是构建不出来,载体和片段连接不上,烦烦烦

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原来,是这样

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
载体和片段的浓度怎么样,连接体系配比怎么样,转化效率怎么样,都会很大程度影响质粒构建的

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2楼2017-11-24 10:06:09
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初学者4396

新虫 (初入文坛)

3楼2017-11-24 10:08:44
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Vet is king

新虫 (文坛精英)

4楼2017-11-24 10:14:34
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小芝芝

铁杆木虫 (知名作家)

5楼2017-11-24 10:18:03
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37℃夏天

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 初学者4396 at 2017-11-24 10:08:44
试一试无缝克隆

无缝克隆是什么

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6楼2017-11-26 10:37:47
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37℃夏天

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原来,是这样 at 2017-11-24 10:06:09
载体和片段的浓度怎么样,连接体系配比怎么样,转化效率怎么样,都会很大程度影响质粒构建的

试剂盒回收浓度太低……

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7楼2017-11-26 10:38:02
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原来,是这样

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 37℃夏天 at 2017-11-26 10:38:02
试剂盒回收浓度太低……
...

你用的哪个公司的,是回收效率太低还是你酶切之后目的片段本来量就少。我用过天根和takara的,效率都还不错。即使回收浓度只有几十ng/ul也是可以做连接的。

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8楼2017-11-26 12:07:33
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3286380144

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以利用同源重组构建质粒

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9楼2017-11-26 23:46:50
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六六六六六

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
同源重组,用infusion酶,好多公司有,只有15ng的浓度我都做出来过

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10楼2017-11-27 09:39:32
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