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不同的紫外分光光度计测出来的同一种物质标曲的斜率会有很大不同吗?
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wangyiyi王
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不同的紫外分光光度计测出来的同一种物质标曲的斜率会有很大不同吗?
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自己测的标准曲线和文献中别人的标准曲线不一样。是不是对于同一种物质在差不多波长下标准曲线的斜率应该要差不多。
有人有SDBS的标准曲线吗,我对照一下。
下面的图一张是别人测的,一张是我自己测的。
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2017-11-22 17:45:22
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标曲斜率没得直接关系,只要在范围内,线性很好就行了
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2017-11-22 19:33:05
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繁夏
at 2017-11-22 19:33:05
标曲斜率没得直接关系,只要在范围内,线性很好就行了
可是看分光光度计的原理:物质的吸光度与稀溶液浓度的关系符合 Beer-Lambert 定律,吸光度 = 吸光系数 × 摩尔浓度 × 吸收光程
一般而言,标准的吸收光谱是在吸收光程为 1cm 的比色皿里测量得到的,吸光系数是物质本身的性质。所以我觉得斜率按道理应该相差不会太大。也不知道这样想对不对
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8楼
2017-11-22 20:31:53
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wangyiyi王
at 2017-11-22 20:31:53
可是看分光光度计的原理:物质的吸光度与稀溶液浓度的关系符合 Beer-Lambert 定律,吸光度 = 吸光系数 × 摩尔浓度 × 吸收光程
一般而言,标准的吸收光谱是在吸收光程为 1cm 的比色皿里测量得到的,吸光系数是物质 ...
理论上是这样,但是要考虑实际情况,一是仪器条件不同,二是操作人员不同,对斜率都会形成偏差,在一定范围内波动,整体趋势不变
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9楼
2017-11-23 08:26:04
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理论上是这样,但是要考虑实际情况,一是仪器条件不同,二是操作人员不同,对斜率都会形成偏差,在一定范围内波动,整体趋势不变
...
不然也就不用每次都需要做标曲,就是因为会发生变化
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10楼
2017-11-23 08:27:22
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繁夏
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不然也就不用每次都需要做标曲,就是因为会发生变化
...
对对,是这个道理。但是就是偏差还挺大,我测的斜率是0.03,别人测的是0.004,差了数量级了。
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11楼
2017-11-23 10:58:00
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wangyiyi王
at 2017-11-23 10:58:00
对对,是这个道理。但是就是偏差还挺大,我测的斜率是0.03,别人测的是0.004,差了数量级了。
...
这个就说不清楚了,你可以自己试试不同机子和不同人看看有多大差异
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12楼
2017-11-23 15:17:41
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2017-11-22 17:45
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2017-11-22 17:47
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