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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 恍恍惚惚反反复复
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

[求助] 恍恍惚惚反反复复

我在扩一个2.5k的片段，同样的体系，同样的方法，时而有条带时而无条带，我真是醉了。。。。

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1楼 2017-11-22 12:14:12
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地球那一刹那

新虫 (小有名气)
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1楼: Originally posted by 凯伦爱佳佳 at 2017-11-22 12:14:12
我在扩一个2.5k的片段，同样的体系，同样的方法，时而有条带时而无条带，我真是醉了。。。。

这个可能，跟你的手法有关系，或者没有混匀，或者引物加错，温度什么的，还有可能是胶的问题

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2楼2017-11-22 12:32:25
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 地球那一刹那 at 2017-11-22 01:32:25
这个可能，跟你的手法有关系，或者没有混匀，或者引物加错，温度什么的，还有可能是胶的问题
...

那我就一个一个的加，不分装了

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3楼2017-11-22 14:11:58
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地球那一刹那

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 凯伦爱佳佳 at 2017-11-22 14:11:58
那我就一个一个的加，不分装了
...

分装的话可能你要之前的体积都*1.1倍然后分装，充分涡旋混匀也是可以的

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4楼2017-11-22 15:10:55
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实验white

新虫 (初入文坛)
我出现这个问题了，想问楼主现在解决了吗？

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5楼2017-11-24 14:47:56
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新生入学207

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 实验white at 2017-11-24 14:47:56
我出现这个问题了，想问楼主现在解决了吗？

出现条带的时候留一点PCR产物做模板，然后取一点点产物重新加引物扩增。

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6楼2017-11-24 23:49:30
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实验white

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 新生入学207 at 2017-11-24 23:49:30
出现条带的时候留一点PCR产物做模板，然后取一点点产物重新加引物扩增。
...

也只能这样了，可是我还不知道什么时候能扩出条带。心塞(?-ω?`)

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7楼2017-11-25 00:17:15
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