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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客


juaner-1983(金币+1,VIP+0): 7-31 09:19
你确定你的Loading Buffer里面加甘油了吗?
For my life!
11楼2009-02-25 22:54:25
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jane8398

铜虫 (初入文坛)


juaner-1983(金币+1,VIP+0): 7-31 09:19
我跑沉淀时也有这种现象
12楼2009-05-18 18:32:25
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

引用回帖:
Originally posted by juaner-1983 at 2009-2-25 20:56:
我做的是全菌的
对数期的菌液1ml,离心,弃上清,取沉淀,
加2*loading buffer 50ml
混匀,沸水浴5min
之后点样就出现了上述问题,飞的不得了
我快疯了,各位高手,能给指点一下迷津吗??

重新配置样品Loading Buffer, 注意其中的甘油含量增加20-50% !

或者: 2* loading buffer 50 uL + 样品15uL。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
13楼2009-05-18 19:40:33
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)

你用的是1*的电泳液么?
14楼2009-05-19 08:28:59
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zt19820823

金虫 (小有名气)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-30 17:53
呵呵 这个问题我也遇到过
是点样孔里的胶没有清理干净 引起这个的原因是梳子薄 两玻璃片间的缝隙大
胶堆在点样孔口上 样品根本就沉不下去
拔梳子后 上样之前 先弄个细点的东西抠抠 再冲冲干净就好啦
15楼2009-05-19 16:27:56
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hu6704526

银虫 (小有名气)

你的loading buffer也加的太多了吧
还是你写错了。
16楼2009-05-19 19:51:11
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jqq1985

银虫 (正式写手)

离心的时间太长的话,甘油会沉下去的,到时候你再吸上清时就会飘起来,沉不下去。
17楼2009-05-20 18:30:52
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zhuyeqing07

金虫 (正式写手)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-30 17:54
菌体密度可能太高了,建议稀释一下

我碰到过一回,上样时样品根本就进不去,稀释以后就好了
18楼2009-05-21 15:25:34
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飞侠8683

新虫 (小有名气)

你配的上样缓冲液是用什么配的?可以多加点甘油,加大沉降系数
19楼2009-05-21 15:37:29
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kekebing

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
loading buffer 的问题吧,是不是上样的时候太猛了
随其自然
20楼2009-06-09 15:33:30
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