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有一只小丸子

新虫 (初入文坛)

[求助] 实验小白求助!要构建基因的过表达和沉默的载体 已有1人参与

要构建一个基因稳定过表达和沉默的细胞株,老师说要先构建载体,现在这个基因的干扰序列找到了,请问我下一步具体要先做什么?要先提目的基因吗?刚到实验室这些问题都不懂,希望大家说具体点 具体做什么实验比如做PCR什么的,谢谢

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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-11-23 07:58:53
先做sh载体和过表达的载体,然后转染到你的目的细胞上。
sh载体需要先设计2条引物,退火形成双链,然后连入sh专用的载体中;
过表达载体,需要先提mRNA,然后逆转录,然后PCR扩你要的目的基因,然后连入过表达的载体中。
需要这两类载体的话,可以站短我。。
2楼2017-11-22 16:15:13
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