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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 寻求高效连接酶，求推荐
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zhou-cuixia

新虫 (初入文坛)

[交流] 寻求高效连接酶，求推荐 已有6人参与

片段不算太大4500bp，载体，pwh1520，7900bp，求推荐高效连接酶。

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1楼 2017-11-20 23:11:10
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chenpp2006

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
效率低的话，多挑几个克隆

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zhou-cuixia
2楼2017-11-21 02:49:29
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zhou-cuixia

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenpp2006 at 2017-11-21 02:49:29
效率低的话，多挑几个克隆

谢谢，基本都是一个平板六个，都没有对的，，有一个上万的，酶切后发现载体大小对，目的片段少了一千多，pcr验证也是竟然P出一个比目的条带一千多的

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3楼2017-11-21 07:26:11
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迷路人啊

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
检查一下片段里面是不是有酶切位点   我们一般用neb 的连接酶   快而且效率挺高

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zhou-cuixia
4楼2017-11-21 11:05:53
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zhou-cuixia

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 迷路人啊 at 2017-11-21 11:05:53
检查一下片段里面是不是有酶切位点   我们一般用neb 的连接酶   快而且效率挺高

谢谢，谢谢！！！

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5楼2017-11-21 15:00:40
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zhou-cuixia

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenpp2006 at 2017-11-21 02:49:29
效率低的话，多挑几个克隆

谢谢！

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6楼2017-11-21 15:01:14
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ksws0465326

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们组常用TOYOBO的Ligation high, 效果挺好，如果有机会可以试试
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7楼2017-11-21 18:02:43
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Neo2000

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
和连接酶效率关系不大，片段大小影响也不大，关键是切的那步和连接比例的问题

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8楼2017-11-21 18:12:13
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议做无缝克隆，推荐诺维赞的同源重组酶，价格也不贵。
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。
9楼2017-11-23 19:02:48
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houmaoqi

版主 (职业作家)

优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
T4 链接酶不行吗？
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Tobeornottobe?
10楼2017-11-25 09:09:20
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