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zhou-cuixia

新虫 (初入文坛)

[交流] 寻求高效连接酶,求推荐 已有6人参与

片段不算太大4500bp,载体,pwh1520,7900bp,求推荐高效连接酶。

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chenpp2006

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
效率低的话,多挑几个克隆

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2楼2017-11-21 02:49:29
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zhou-cuixia

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chenpp2006 at 2017-11-21 02:49:29
效率低的话,多挑几个克隆

谢谢,基本都是一个平板六个,都没有对的,,有一个上万的,酶切后发现载体大小对,目的片段少了一千多,pcr验证也是竟然P出一个比目的条带一千多的

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3楼2017-11-21 07:26:11
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迷路人啊

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
检查一下片段里面是不是有酶切位点   我们一般用neb 的连接酶   快而且效率挺高

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4楼2017-11-21 11:05:53
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zhou-cuixia

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 迷路人啊 at 2017-11-21 11:05:53
检查一下片段里面是不是有酶切位点   我们一般用neb 的连接酶   快而且效率挺高

谢谢,谢谢!!!

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5楼2017-11-21 15:00:40
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zhou-cuixia

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenpp2006 at 2017-11-21 02:49:29
效率低的话,多挑几个克隆

谢谢!

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6楼2017-11-21 15:01:14
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ksws0465326

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们组常用TOYOBO的Ligation high, 效果挺好,如果有机会可以试试
7楼2017-11-21 18:02:43
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Neo2000

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
和连接酶效率关系不大,片段大小影响也不大,关键是切的那步和连接比例的问题

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8楼2017-11-21 18:12:13
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
建议做无缝克隆,推荐诺维赞的同源重组酶,价格也不贵。
9楼2017-11-23 19:02:48
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houmaoqi

版主 (职业作家)

优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
T4 链接酶不行吗?
Tobeornottobe?
10楼2017-11-25 09:09:20
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