[交流] 重组质粒转入感受态以后，在抗性平板上长了1-4个菌落算正常吗？

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1楼2017-11-16 14:23:23

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yesucao

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菌P一下看是否有自己想要的，若有的话不在乎多少。

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6楼2017-11-16 21:42:39

yesucao

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8楼: Originally posted by a5255661 at 2017-11-19 14:13:19
菌P需要质粒抽提吗？...

菌长得大的话，可以不用抽提质粒，用10ul的枪头刮一点做PCR，要是菌长得小可以培养基接种摇过夜，用1-2ul菌液做PCR，剩余的菌液先不要扔了，要是菌液能P出目的条带的话，当天把对应摇的剩余菌液抽提质粒赶紧备份。

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10楼2017-11-19 19:26:28

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甚玩意儿

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很正常啊

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2楼2017-11-16 14:30:08

艾喵喵

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正常啊

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3楼2017-11-16 14:57:50

陆封肆闭

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正常

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4楼2017-11-16 15:37:06

哪吒ap

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很正常，我的长了三个

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5楼2017-11-16 16:59:32

前行的璐

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你可以菌落pcr验证，做之后的实验，如果是正确的，少也没事

7楼2017-11-17 10:06:03

a5255661

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6楼: Originally posted by yesucao at 2017-11-16 21:42:39
菌P一下看是否有自己想要的，若有的话不在乎多少。

菌P需要质粒抽提吗？

8楼2017-11-19 14:13:19

a5255661

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7楼: Originally posted by 前行的璐 at 2017-11-17 10:06:03
你可以菌落pcr验证，做之后的实验，如果是正确的，少也没事

菌落pcr验证需要质粒抽提吗？

9楼2017-11-19 14:19:01

前行的璐

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9楼: Originally posted by a5255661 at 2017-11-19 14:19:01
菌落pcr验证需要质粒抽提吗？...

菌落pcr是不需，你转化后涂板，过夜培养后挑单菌落于ddH2O,取1微菌液做模板，进行pcr

11楼2017-11-20 19:29:34

前行的璐

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9楼: Originally posted by a5255661 at 2017-11-19 14:19:01
菌落pcr验证需要质粒抽提吗？...

菌落pcr不需，你将转化后的板子上的单菌落挑至10微的ddH2O中，取1微升的菌液做模板，做pcr

12楼2017-11-20 19:39:44

布za

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你又出现过有时候长很多，有时候长得两三个

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13楼2018-01-05 09:58:02

iwfyoyo

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正常的，做个菌落PCR

14楼2018-01-05 10:14:33

聪明的胖子

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只想说我们重组的长几个斑不算正常，你可以试下菌液PCR试一试，看看对不对，在去决定下一步

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15楼2018-01-12 21:34:58

drwhoknowss

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不管几个，找到自己想要的就好。菌落多少不是成功与否的标准

16楼2018-01-13 12:32:30