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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 对于PCR有点疑问，请大神赐教
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353378132

新虫 (小有名气)

[求助] 对于PCR有点疑问，请大神赐教

PCR用RNA做引物的话每轮循环引物都会减少吗，因为合成完后要逐个切除引物（具体是不是逐个我也不清楚），还有对于线性DNA由于切除引物后没法补齐末端，多次循环后末端会不会缩短，就像端粒缩短一样

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1楼 2017-11-15 17:50:25
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niil

金虫 (正式写手)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-11-16 07:55:16
用RNA做引物的话，由于DNA聚合酶不能用RNA做模板，所以在产物里引物对应的位置应该不能扩增出来吧，所以产物不会以指数形式扩增，且产物对应的末端会丢失，但是不会像端粒那样逐渐缩短，因为一旦引物对应位置丢失，就不能产生复制，没有复制产生就谈不上缩短了。

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Stop fighting,let it flow.
2楼2017-11-15 20:06:18
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刘阿杰T

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by niil at 2017-11-15 20:06:18
用RNA做引物的话，由于DNA聚合酶不能用RNA做模板，所以在产物里引物对应的位置应该不能扩增出来吧，所以产物不会以指数形式扩增，且产物对应的末端会丢失，但是不会像端粒那样逐渐缩短，因为一旦引物对应位置丢失， ...

是不是意味着PCR的第一个循环需要RNA引物，第二个循环开始就不需要RNA引物了

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3楼2017-11-17 11:21:31
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刘阿杰T

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by niil at 2017-11-15 20:06:18
用RNA做引物的话，由于DNA聚合酶不能用RNA做模板，所以在产物里引物对应的位置应该不能扩增出来吧，所以产物不会以指数形式扩增，且产物对应的末端会丢失，但是不会像端粒那样逐渐缩短，因为一旦引物对应位置丢失， ...

是不是意味着PCR的第一个循环需要RNA引物，第二个循环开始就不需要RNA引物了

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4楼2017-11-17 11:21:33
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niil

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 刘阿杰T at 2017-11-17 11:21:31
是不是意味着PCR的第一个循环需要RNA引物，第二个循环开始就不需要RNA引物了
...

引物是要结合到模板上就可以合成DNA,每个循环什么情况是可以模拟出来的。需不需要RNA引物要看上一个循环产生了什么。

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Stop fighting,let it flow.
5楼2017-11-17 20:50:05
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刘阿杰T

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by niil at 2017-11-17 20:50:05
引物是要结合到模板上就可以合成DNA,每个循环什么情况是可以模拟出来的。需不需要RNA引物要看上一个循环产生了什么。
...

还是不太懂，能详细解释一下吗？或者可以推荐一下相关的书籍或者文献，想好好学习一下相关知识

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6楼2017-11-18 08:07:23
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