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饭团团529

新虫 (初入文坛)

[求助] 真菌DNA提取及qPCR通用引物 已有1人参与

老板让研究真菌,买了索莱宝家的真菌DNA提取试剂盒,第一次提白念,效率不是太好,纯度1.1,浓度3.3,用的是生理盐水稀释,考虑要不要换成液态沙保弱,过夜增菌培养后再提一下试试。
另外在文献上查到了一对真菌qPCR通用引物,在验证引物的特异性,用了大肠,金葡和正常人DNA,大肠没有扩增曲线,金葡和正常人均有扩增曲线,但是CT值都大于33了,白念的CT值为25,求助一下大家,引物是否可以用呢?
另外看了文献用的是QIAamp的提取试剂盒,有用过的大神提取的效率怎么样呢?

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小楚丶

新虫 (小有名气)

你得有对照才能说明问题

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2楼2017-11-12 13:10:07
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饭团团529

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小楚丶 at 2017-11-12 13:10:07
你得有对照才能说明问题

是阴性对照吗?用灭菌水做了阴性对照,CT值37或者是没有CT值

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3楼2017-11-12 18:13:33
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
试引物一般用普通PCR,做Q不合适,也没必要
4楼2017-11-13 08:58:41
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