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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 真菌DNA提取及qPCR通用引物
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饭团团529

新虫 (初入文坛)

[求助] 真菌DNA提取及qPCR通用引物 已有1人参与

老板让研究真菌，买了索莱宝家的真菌DNA提取试剂盒，第一次提白念，效率不是太好，纯度1.1，浓度3.3，用的是生理盐水稀释，考虑要不要换成液态沙保弱，过夜增菌培养后再提一下试试。
另外在文献上查到了一对真菌qPCR通用引物，在验证引物的特异性，用了大肠，金葡和正常人DNA,大肠没有扩增曲线，金葡和正常人均有扩增曲线，但是CT值都大于33了，白念的CT值为25，求助一下大家，引物是否可以用呢？
另外看了文献用的是QIAamp的提取试剂盒，有用过的大神提取的效率怎么样呢？

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1楼 2017-11-12 11:07:22
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小楚丶

新虫 (小有名气)
你得有对照才能说明问题

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2楼2017-11-12 13:10:07
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饭团团529

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小楚丶 at 2017-11-12 13:10:07
你得有对照才能说明问题

是阴性对照吗？用灭菌水做了阴性对照，CT值37或者是没有CT值

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3楼2017-11-12 18:13:33
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试引物一般用普通PCR，做Q不合适，也没必要
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4楼2017-11-13 08:58:41
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