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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 求助:配药时的带菌问题---

我正在做细胞毒理试验,药物是脂溶性的,所以要用DMSO溶解;已经做过几次试验,前面还好,但在最近的两次试验中都出现加药组被污染的问题;嗯,称量药物是在超净台外进行的,溶解药物是在超净台做的,所以感觉不可避免的会有菌,不知道该怎么办? 请各位前辈帮我支支招,谢谢!
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

配好溶液后灭菌或者0.22微米孔径的滤膜过滤处理
For my life!
2楼2009-02-23 11:53:27
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

高温灭菌恐怕不行,药物可能会分解;过滤的话因为我现在用的滤膜是过滤培养基的,水溶性的,不能滤DMSO;
     现在还有一个解决方案是直接配好加药的培养基,再过滤,那样DMSO的量就会少很多,不知道那样能不能过滤?
     药物的分子量是400左右,0.22微米孔径的滤膜过滤处理会有问题吗?
3楼2009-02-23 12:27:06
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客

分力量才400,100kd的孔径才7.4nm,可以不选水溶性的膜,膜有很多种,找一种可以滤的就行了。
For my life!
4楼2009-02-23 14:07:36
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

嗯 确实如此 谢谢你的帮助!
5楼2009-02-23 14:11:57
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taotao4108

金虫 (正式写手)

无理

引用回帖:
Originally posted by jianwu118 at 2009/2/23 12:27:
高温灭菌恐怕不行,药物可能会分解;过滤的话因为我现在用的滤膜是过滤培养基的,水溶性的,不能滤DMSO;
     现在还有一个解决方案是直接配好加药的培养基,再过滤,那样DMSO的量就会少很多,不知道那样能不能 ...

可以先用DMSO溶解,就是药品里面有菌,在DMSO的作用下它也活不成,然后再用除菌后的培养基稀释到适用浓度。楼主应该是要做MTT之类的实验,一定要做一个DMSO的对照,因为DMSO本来就可以诱发细胞凋亡,要使最终的数据具有说服力,DMSO对照必须要做。
6楼2009-02-24 09:51:05
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

嗯 这个我也考虑过了 回想试验步骤  发现我配好药后就放入-20冰箱冻存了 可能这期间DMSO没有起到溶菌作用 我会改进的  谢谢 taotao4108的提醒和帮助!  
7楼2009-02-24 22:16:37
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