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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助:配药时的带菌问题---
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 求助:配药时的带菌问题---

我正在做细胞毒理试验，药物是脂溶性的，所以要用DMSO溶解；已经做过几次试验，前面还好，但在最近的两次试验中都出现加药组被污染的问题；嗯，称量药物是在超净台外进行的，溶解药物是在超净台做的，所以感觉不可避免的会有菌，不知道该怎么办？ 请各位前辈帮我支支招，谢谢！
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1楼 2009-02-23 11:35:05
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
配好溶液后灭菌或者0.22微米孔径的滤膜过滤处理
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For my life！
2楼2009-02-23 11:53:27
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)
高温灭菌恐怕不行，药物可能会分解；过滤的话因为我现在用的滤膜是过滤培养基的，水溶性的，不能滤DMSO；
     现在还有一个解决方案是直接配好加药的培养基，再过滤，那样DMSO的量就会少很多，不知道那样能不能过滤？
     药物的分子量是400左右，0.22微米孔径的滤膜过滤处理会有问题吗？
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3楼2009-02-23 12:27:06
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
分力量才400，100kd的孔径才7.4nm，可以不选水溶性的膜，膜有很多种，找一种可以滤的就行了。
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For my life！
4楼2009-02-23 14:07:36
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)
嗯 确实如此 谢谢你的帮助！
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5楼2009-02-23 14:11:57
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taotao4108

金虫 (正式写手)

无理
引用回帖:
Originally posted by jianwu118 at 2009/2/23 12:27:
高温灭菌恐怕不行，药物可能会分解；过滤的话因为我现在用的滤膜是过滤培养基的，水溶性的，不能滤DMSO；
     现在还有一个解决方案是直接配好加药的培养基，再过滤，那样DMSO的量就会少很多，不知道那样能不能 ...

可以先用DMSO溶解，就是药品里面有菌，在DMSO的作用下它也活不成，然后再用除菌后的培养基稀释到适用浓度。楼主应该是要做MTT之类的实验，一定要做一个DMSO的对照，因为DMSO本来就可以诱发细胞凋亡，要使最终的数据具有说服力，DMSO对照必须要做。
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6楼2009-02-24 09:51:05
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jianwu118

至尊木虫 (著名写手)
嗯 这个我也考虑过了 回想试验步骤  发现我配好药后就放入-20冰箱冻存了 可能这期间DMSO没有起到溶菌作用 我会改进的  谢谢 taotao4108的提醒和帮助！  
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7楼2009-02-24 22:16:37
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