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河外星系的三

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助～ 已有2人参与

Q sepharose-柱层析 影响样品在柱内的移动快慢的因素有哪些(??_?`)

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1楼 2017-11-06 23:06:21
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

影响流速的，主要有1）样品的粘度，2）进入柱子液体的压力（注意这个柱子耐压不能超过0.3MPA），3）Q填料的质量也很关键，粒径越小流速越慢。4）柱子的直径，5）柱子的高度，基本就这些。
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5楼2017-11-07 10:06:03
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普通回帖

药师1206

金虫 (正式写手)
分子量和极性，这个主要是分子筛色谱分子量越小移动越满

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2楼2017-11-07 00:40:14
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药师1206

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 药师1206 at 2017-11-07 00:40:14
分子量和极性，这个主要是分子筛色谱分子量越小移动越满

分子量越小移动越慢，还有极性小的也会一定程度变慢。

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3楼2017-11-07 00:42:01
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 药师1206 at 2017-11-07 00:40:14
分子量和极性，这个主要是分子筛色谱分子量越小移动越满

这个是离子交换层析，不是分子筛。
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4楼2017-11-07 10:03:29
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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
赞同五楼。填料确定了，影响你样品在柱子内移动快慢的就是样品的粘度和带电性以及进样速度和流动相压力（流速）。粘的样品移动慢；流动相压力大流速快，样品移动较快；带正电荷的组分不与填料作用直接流穿，负电荷组分因为与填料基团作用吸附，会在洗脱前停留在填料内孔。这里说一下，上样不宜过快，流动相的流速和压力要在填料的推荐操作范围。
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6楼2017-11-08 09:23:29
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